Vol. 21, Nr. 2/2011

REZUMAT

S-a testat dezvoltarea algelor unicelulare din genul Prototheca pe urmatoarele medii solide de cultura: mediu cu ou, mediu cu gelatina, mediu cu diferite solutii colorante (albastru de metilen, rosu de Congo, rosu carmin, verde de malachit), geloza glucozata cu diferite valori de pH în scara 2 la 9. S-au testat tulpini de P. zopfii izolate de la vaci cu mamita si o tulpina de P wicherhamii (ATCC 16529). S-au verificat atât tulpini în cultura pura, cât si în diferite amestecuri cu bacterii Gram negative (£. coli, Proteus), Gram pozitive (Staphylococcus, Micrococcus) si levuri (Candida). Incubarea s-a facut în conditii de aerobioza la temperatura de 37°C pentru primele 48 de ore, dupa care placile s-au pastrat la temperatura laboratorului timp de 5-7 zile. La examinarea coloniilor s-a apreciat marimea si culoarea, dar pentru a surprinde detalii privind aspectul marginilor, suprafata, cromatica, opacitatea, s-a facut examinarea la lupa cu x1,6 si x4. Din coloniile dezvoltatea pe suprafata mediilor s-au efectuat frotiuri umede în solutie Lugol, urmarind caracterele morfologice ale celulelor. Elementele semnificative prin care se identifica prototecile sunt dimensiunile, structura interna si îndeosebi celule aflate în diferite faze de multiplicare (formarea septului despartitor, corpii densi, clivajul asimetric al citoplasmei, formarea endosporilor). Prototecile s-au dezvoltat mai bine pe mediul cu ou, la ambele specii identificându-se numeroase celule la care se evidentia septul separator care precede clivajul citoplasmatic, urmat de formarea endosporiilor, ceea ce înseamna ca este stimulata cresterea si multiplicarea. O crestere semnificativa se produce si pe mediul cu cartof, coloniile având o pronuntata crestere în înaltime cu aspect de burjeoni, prin care se diferentiaza de coloniile altor bacterii sau levuri. Pe mediul cu gelatina cresterea a fost mai lenta si erau putine celule aflate în faza de multiplicare, ceea ce înseamna ca valoarea nutritiva a mediului este scazuta. Pe mediile cu substante colorante, cresterea a fost satisfacatoare, pe mediile cu albastru de- metilen coloniile ambelor specii au avut culoare galbena intensa si o crestere pronuntata în înaltime. De asemenea, au crescut abundent si pe mediul cu rosu de Congo, coloniile ambelor specii au avut o culoare rosie zmeurie stralucitoare si un aspect bombat. S-au dezvoltat si pe mediul cu rosu carmin, dar fara a constata aspecte particulare. Pe mediul cu diferite valori de pH (geloza glucozata), prototecile s-au dezvoltat atât în mediu acid cât si în mediu bazic. S-a constatat ca mediul acid (pH-3) are caracter selectiv, fiind inhibata atât dezvoltarea bacteriilor, cât si a levurilor. O astfel de varianta de mediu poate fi luata în considerare la efectaurea însamântarilor din probele intens contaminate. Pentru identificarea prototecilor este foarte important ca examinarea coloniilor sa se faca la lupa, chiar de la 24 de ore, întrucât coloniile prezinta un aspect caracteristic de cristale de gheata, cu irizatii stralucitoare, iar din colonii sa se faca frotiuri umede în solutie Lugol, pentru aprecierea caracterelor mofologice. Dimensiunile, forma si prezenta celulelor cu endospori, constituie criterii importante pentru identificare si permit diferentierea certa de alte microorganisme.